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2020-07-01
把細(xì)胞養(yǎng)好的三個(gè)關(guān)鍵要素是：良好的細(xì)胞來源，正確的實(shí)驗(yàn)操作，以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要?jiǎng)?chuàng)造適合細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境，給細(xì)胞建立一個(gè)滿意的“家”。細(xì)胞培養(yǎng)基本條件：1.合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。2.優(yōu)質(zhì)血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一，含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的多種生長(zhǎng)因子及其它營養(yǎng)成分。3.無菌...2020-06-10
顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在電解質(zhì)參與下所形成的肉眼可見的凝集現(xiàn)象，稱為凝集反應(yīng)。其中的抗原稱為凝集原，抗體稱為凝集素。在該反應(yīng)中，因?yàn)閱挝惑w積抗體量大，做定量實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)稀釋抗體。1.直接凝集反應(yīng)玻片凝集法：是一種常規(guī)的定性試驗(yàn)方法。原理是用已知抗體來檢測(cè)未知抗原。常用于鑒定菌種、血型。如將含有痢疾桿菌抗體的血清與待檢菌液各一滴，在玻片上混勻，數(shù)分種后若出現(xiàn)肉眼可見的凝集塊，即陽性反應(yīng)，證明該菌是痢疾桿菌。此法快速、簡(jiǎn)便，但不能進(jìn)行定量測(cè)定。試管凝集法：是一種定量試驗(yàn)方法。多...2020-05-21
胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。如何擇取胎牛血清的質(zhì)量：1、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分，因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前，國產(chǎn)血清基本都能達(dá)到這一要求，很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高，只要求不高于50EU/ml，高出我國標(biāo)準(zhǔn)10倍?？梢?，內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量，除非含...2020-05-19
ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年，假設(shè)保存妥當(dāng)?shù)脑挘粫?huì)出現(xiàn)疑問的。但不要重復(fù)凍融。當(dāng)然假設(shè)是正常的DAS-ELISA查看試劑盒等，應(yīng)當(dāng)放在4℃支配冰箱保存。建議ELISA試劑盒凍結(jié)后一次用完。已開封或許運(yùn)用后，剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，ELISA查看試劑盒開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免濕潤(rùn)。但要留意的是，假設(shè)將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來就當(dāng)即運(yùn)用的話，也許會(huì)影響，其直接的效果是對(duì)一些弱陽性標(biāo)本的查看出現(xiàn)假陰性。建議：先從冰箱...2020-05-13
ELISA試劑盒價(jià)格加樣時(shí)的防錯(cuò)小經(jīng)驗(yàn)(1)用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報(bào)紙，墊在下面，這樣，加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會(huì)變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。(2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別(3)在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分ELISA試劑盒試驗(yàn)的操作方法:(1)將抗原按一定的梯度倍比稀釋后，按照ELISA從上到下(或者從左到右)的順序包被。(2)將抗體按一定的梯度倍比稀釋后按照ELISA從左到右或者從上到下加入。(3)二抗的...2020-04-28
污染向來是在細(xì)胞培養(yǎng)中的大問題。預(yù)防或治理污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素。我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)時(shí)，在開始階段就要十分重視污染問題，否則會(huì)前功盡棄，這樣不僅浪費(fèi)時(shí)間，也會(huì)浪費(fèi)人力、物力。(一)有哪幾類污染？在細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染不只是指微生物，而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對(duì)細(xì)胞生存有害或造成細(xì)胞不純的物質(zhì)，包括生物和化學(xué)物質(zhì)。1、細(xì)菌污染細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染，即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴?。見的有革蘭氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假...2020-03-31
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見原因如下：a)可能原因：加樣本及試劑量不準(zhǔn)；孔間不一致；解決方法：校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密。重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與在次接近；重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；樣品稀釋前應(yīng)充分混勻。b)可能原因：加樣過快，孔間發(fā)生污染；解決方法：重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；加樣不要過快。c)可能原因：加錯(cuò)樣本；解決方法：檢查記...